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固相萃取的一般步驟

更新時(shí)間:2022-12-02      點(diǎn)擊次數:2090
  固相萃取的基本程序一般可分為以下五個(gè)步驟,但在實(shí)際應用中可根據分析手段對樣品的要求對這五個(gè)步驟進(jìn)行增加或減少。比如,當使用離子交換原理進(jìn)行樣品萃取時(shí)就需要增加調節萃取體系pH的步驟。
  步驟:
  1.固相萃取柱的預處理活化:用適當的溶液對固相萃取柱進(jìn)行預處理活化,可以展開(kāi)碳氫鏈,增加和目標分析物作用的表面積,可以除去柱上吸附的對分析有影響的雜質(zhì),保證良好的萃取再現性,同時(shí)注意在上樣前預處理好的固相柱必須保持濕潤。
  2.固相萃取柱的上樣:將樣品加于固相萃取柱中,用正壓或負壓使樣品通過(guò)柱子,控制好樣品的流速,對于生物樣品,一般控制在1.5 ml/min。對于以離子交換為作用機理的萃取,樣品通過(guò)固相萃取柱的速度應該適當的降低,以保證分析物有足夠的時(shí)間與SPE柱填料的離子交換功能團發(fā)生充分的作用。
  3.固相萃取柱的淋洗:用適當的清洗溶劑選擇性地洗掉附著(zhù)力弱的雜質(zhì)而保留目標分析物于固相萃取柱上。清洗溶劑的選擇取決于最后的分析手段。
  4.固相萃取柱的干燥:如最后的清洗溶劑為緩沖溶液或水溶性有機溶劑,而分析手段為反相HPLC,固相柱上的殘留水對分析影響不大。但是,當洗脫劑為非水溶性有機溶劑或分析手段又為GC或GC-MS時(shí),固相柱的干燥就顯得特別重要。
  5.目標分析物的洗脫:選擇洗脫溶劑時(shí)必須考慮有足夠強度的洗脫劑,要以最小用量的洗脫劑將盡可能多的目標分析物洗脫下來(lái);同時(shí)還要兼顧洗脫劑必須有足夠的選擇性,選擇只將目標分析物洗脫,而吸附力強的雜質(zhì)保留在柱上。
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